甘草中甘草苷的含量測定
Gancao
GLYCYRRHIZAERADIXETRHIZOMA
本品為豆科植物甘草(GlycyrrhizauralensisFisch.、脹果甘草GlycyrrhizainflataBat.或光果甘草GlycyrrhizaglabralL.的干燥根和根莖。春、秋二季采挖，除去須根，曬干。
【性狀】甘草根呈圓柱形，長25～100cm，直徑0.6～3.5cm。外皮松緊不一。表面紅棕色或灰棕色，具顯著的縱皺紋、溝紋、皮孔及稀疏的細根痕。質堅實，斷面略顯纖維性，
黃白色，粉性，形成層環明顯，射線放射狀，有的有裂隙。根莖呈圓柱形，表面有芽痕，斷面中部有髓。氣微，味甜而特殊。
脹果甘草根和根莖木質粗壯，有的分枝，外皮粗糙，多灰棕色或灰褐色。質堅硬，木質纖維多，粉性小。根莖不定芽多而粗大。
光果甘草根和根莖質地較堅實，有的分枝，外皮不粗糙，多灰棕色，皮孔細而不明顯。
【鑒別】(1)本品橫切面：木栓層為數列棕色細胞。栓內層較窄。韌皮部射線寬廣，多彎曲，常現裂隙；纖維多成束，非木化或微木化，周圍薄壁細胞常含草酸鈣方晶；篩管群常因壓縮而變形。束內形成層明顯。木質部射線寬3～5列細胞；導管較多，直徑約至160μm；木纖維成束，周圍薄壁細胞亦含草酸鈣方晶。根中心無髓；根莖中心有髓。
粉末淡棕黃色。纖維成束，直徑8～14μm，壁厚，微木化，周圍薄壁細胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維。草酸鈣方晶多見。具緣紋孔導管較大，稀有網紋導管。木栓細胞紅棕色，多角形，微木化。
(2)取本品粉末1g，加乙醚40ml，加熱回流1小時，濾過，棄去醚液，藥渣加甲醇30ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水40ml使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗滌3次，棄去水液，正丁醇液蒸于，殘渣加甲醇5ml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取甘草酸單銨鹽對照品，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，作為對照品溶液。照《薄層色譜法檢驗標準操作程序》(附錄ⅥB)試驗，吸取上述三種溶液各l～2μl，分別點于同一用1％氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯一甲酸一冰醋酸一水(15：l：1：2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴
以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；在與對照品色譜相應的
位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點。
【檢查】水分不得過12.0％(附錄ⅨH第一法)。
總灰分不得過7.0％(附錄ⅨK)。
酸不溶性灰分不得過2.0％(附錄ⅨK)。
重金屬及有害元素照鉛、鎘、砷、汞、銅測定法(附錄ⅨB原子吸收分光光度法或電感耦合等離子體質譜法)測定，鉛不得過百萬分之五；鎘不得過千萬分之三；砷不得過百萬分之二；汞不得過千萬分之二；銅不得過百萬分之二十。
有機氯農藥殘留量照農藥殘留量測定法(附錄ⅨQ有機氯類農藥殘留量測定)測定，六六六(總BHC)不得過千萬分之二；滴滴涕(總DDT)不得過千萬分之二；五氯硝基苯(PCNB)不得過千萬分之一。
【含量測定】照《高效液相色譜法檢驗標準操作程序》測定。
色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈為流動相A，以0.05％磷酸溶液為流動相B，按下表中的規定進行梯度洗脫；檢測波長為237nm。理論
板數按甘草苷峰計算應不低于5000。
時間（分鐘）流動相A（%）流動相B（%）
0~8 19 81
8~35 19~50 81~50
35~36 50~100 50~0
36~40 100~19 0~81
對照品溶液的制備取甘草苷對照品、甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加70％乙醇分別制成每1ml含甘草苷20μg、甘草酸銨0.2mg的溶液，即得(甘草酸重量一甘草酸銨重量／1.0207)。
供試品溶液的制備取本品粉末(過三號篩)約O.2g，精
密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70％乙醇100ml，密塞，稱
定重量，超聲處理(功率250W，頻率40kHz)30分鐘，放冷，再
稱定重量，用70％乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾
液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各
10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
本品按干燥品計算，含甘草苷(C21H22O9)不得少于0.50％，甘草酸(C42H62O16)不得少于2.0％。
